two-point testcross即兩點測交,是指每次只測定兩個基因間的遺傳距離,這是基因定位的最基本方法。它是利用雙雜合體與一雙隱性純合體測交,從所得后代中分析重組類型所占的百分比,從而求出重組率的方法。利用兩點測交法,每次只能測定兩個基因位點間的相對距離,因此對于要測定某3個基因位點之間的距離和順序,則需要分別進行3次雜交和3次測交,如要確定4對基因,則需6次雜交和6次測交,工作量非常大,并且由于環(huán)境或基因間的影響,使得測定結果會發(fā)生偏差;另外在兩點測交中,對于基因間的雙交換是無法檢出的,因為雙交換后不會在后代中出現(xiàn)重組類型。