ELISA實驗結(jié)果為什么不穩(wěn)定？

M13****213 2021-10-04 12:38

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  袁汝高

  2021-10-04 13:03
  
  ELISA是目前國內(nèi)臨床檢驗科室最為常用的免疫檢驗方法，常用于一些重要檢測項目如傳染病或感染性疾病病原體的抗原和特異抗體、腫瘤標志物等常規(guī)檢測，其檢測結(jié)果的精準度直接影響到臨床診斷、治療檢測和預(yù)后評估。
  臨床醫(yī)學實驗室常用ELISA測定的項目有：HBsAg、HBeAg、抗-HCV、抗-HBs、梅毒抗體、特異lgM抗體、抗-HBe和抗-HBc等，大多采用雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、捕獲法以及競爭抑制法等。但由于ELISA測定的環(huán)節(jié)較為煩瑣，尤其是加樣、溫育以及洗板等環(huán)節(jié)在實際操作過程中更要格外謹慎，稍稍有一點馬虎或者不符合規(guī)范就會影響結(jié)果的準確性。
  要保證檢測結(jié)果的精準度，實現(xiàn)在不同實驗室間檢驗結(jié)果的一致性，檢驗結(jié)果必須要有溯源性。檢驗結(jié)果能否實現(xiàn)溯源性，取決于檢測系統(tǒng)，即完成檢測所需要的儀器、試劑、校準品和操作程序的組合。一直以來，我國政府對ELISA檢測的相關(guān)傳染病十分重視，如艾滋病、梅毒等，但是在ELISA標準化方面所做的工作還不足。這就導(dǎo)致了檢測結(jié)果容易出現(xiàn)假陽性、假陰性，大大降低了治療質(zhì)量，也損害了人民群眾的身體健康，給患者和醫(yī)療機構(gòu)造成了不可估量的損失。
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  fhjjhyb5454584

  2021-10-04 13:08
  
  加樣的準確性對你的結(jié)果影響很大。用排槍時，裝好槍頭后可以先吸一下看看各個槍頭的吸液量是否一致，最好用手逐個擰一下；一般來說加樣時用單槍加，加二抗和顯色劑A、B時用排槍影響不大。
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  涼兮Armani

  2021-10-04 13:15
  
  由于ELISA實驗靈敏度很高，所以即使是平行孔也很容易出現(xiàn)較大誤差。以我的你經(jīng)驗來看做這類實驗（比方說QPCR）最好用靈敏度進口的槍配合吸附較小的槍頭完成比較好。如果有排槍幫助那樣會減小不少誤差。這類實驗還是需要一些動作的穩(wěn)定性的。
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  S.W.A.T._103

  2021-10-04 13:15
  
  影響ELISA實驗結(jié)果的原因有很多。(1)移液槍的準確度如何?如果移液槍的有較大的誤差則會使每次的吸取的試劑尤其是抗原抗體不一致，導(dǎo)致兩次結(jié)果的相差較大。(2)抗原抗體的保存條件是否準確？作為蛋白不可反復(fù)凍融，以免有效結(jié)合位點變化。(3)檢查一下洗滌步驟，如果洗滌不干凈，會影響結(jié)果。
  您可以說的再清楚一點，比如怎么操作，數(shù)據(jù)怎樣。這樣我們好根據(jù)具體情況來分析。
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